Análisis mediante Microarray de la expresión de la proteína 1 de la familia del factor trébol (TFF1, pS2) en la colecistitis crónica y el carcinoma de vesícula biliar.

Investigamos la expresión de TFF1 en la mucosa de la vesícula biliar no neoplásica sana e inflamada, así como en los carcinomas de vesícula biliar (n = 57) y las metástasis correspondientes (n = 18), utilizando un microarray de tejidostécnica.

La inmunoreactividad de TFF1 estuvo ausente en la mucosa sana, se observó focalmente en el epitelio con cambios inflamatorios y se presentó en el 35% de los tejidos de cáncer primario y el 24% de los metastásicos. La inmunoreactividad disminuyó significativamente al aumentar el estadio tumoral (P = 0.009) y al aumentar el grado del tumor (P = 0.001). Los pacientes con tumores positivos para TFF1 mostraron un resultado más favorable en comparación con los pacientes con tumores negativos para TFF1 en el análisis univariado (P = 0,006).

En conclusión, TFF1 se expresa en el epitelio de la vesícula biliar no neoplásico inflamado y en los carcinomas de estadio bajo y de bajo grado. Por lo tanto, TFF1 puede ser el eslabón perdido entre los cálculos biliares, la colecistitis crónica y cáncer de vesícula biliar. 

Referencias Bibliográficas: 
1. Peter K, Peter R, Martina L, Margit GK, Cord L. Pubmed. [Online].; 2005 [cited 2019 noviembre 23. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15821928.

2. Vídeo obtenido de: https://www.youtube.com/watch?time_continue=1&v=ePFE7yg7LvM&feature=emb_logo

Prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa en la Colelitiasis

PCR-MULTIPLEX

TEMA: Efecto protector de α- talasemia en la colecistitis y la colecistectomía en la enfermedad de células falciformes

OBJETIVO: Conocer el papel protector de las deleciones de genes individuales de α- talasemia en la aparición de colelitiasis y colecistitis en pacientes de SCD, para correcto diagnóstico y tratamiento.

MUESTRA: Muestras de sangre periférica de 102 pacientes ambulatorios SCD (47% hombres y 53% mujeres).

TIPOS DE ADN: ADN genómico de muestras de sangre periférica.

GENES A AMPLIFICAR CON EL TAMAÑO EN PARES DE BASES: Genes individuales α-thal comunes -α 3,7 (2022/2029 pb); -α 4,2 (1628 pb) y el gen α 2 (1800 pb).

EXTRACCIÓN DEL ADN: 
El ADN genómico se aisló de sangre periférica. Leucocitos con Biopur Kit Mini Spin Plus (Biometrix® Diagnostic, Curitiba, Brasil) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Además, la muestra de ADN se cuantificó en NanoDrop ® (Thermo Scientific, EE. UU.).

PCR MULTIPLEX: 
-Desnaturalización: 95 ° C durante 5 min.

-Hibridación: 30 ciclos de hibridación (98 ° C durante 45 s, 63 ° C durante 90 s y 72 ° C durante 135 s).

-Elongación: 72 ° C durante 5 min.

MÉTODOS: El genotipo de α-globina se determinó en 83 pacientes con SCD utilizando la reacción en cadena de la polimerasa múltiple y se comparó con los eventos clínicos.

VISUALIZACIÓN: Electroforesis 15 μl de producto a través de un gel de agarosa al 1% en 1X TBE durante 1 hora.

SENSIBILIDAD y ESPECIFICIDAD: 

La presencia de cálculos biliares pigmentadas con diagnóstico fue confirmado por ultrasonografía (USG) ( n = 77/83) y / o por la colecistectomía ( norte= 38/83). Además, la presencia de dolor abdominal aguda recurrente asociada con colelitiasis se registró como la colelitiasis sintomática (26/38). (2) colecistitis: Cualquier episodio de dolor abdominal en el  cuadrante superior derecho con fiebre o Murphy positivo cuadrante superior derecho con fiebre o Murphy positivo cuadrante superior derecho con fiebre o Murphy positivo cuadrante superior derecho con fiebre o Murphy positivo cuadrante superior derecho con fiebre Murphy positivo cuadrante superior derecho con fiebre o Murphy positivo =21/38) requirieron hospitalización. (3) secuestro esplénico agudo (CULO): Cualquier registro de CULO y / o esplenectomía. (4) La hidroxiurea (HU): el uso de la terapia con medicamentos es para un período mínimo de 12 meses ( n = 61/83 pacientes)

Referencias Bibliográficas:
1. Pontes RM, Costa ES, Siqueira PFR, Medeiros JFF, Soares A, de Mello F V., et al. Protector effect of α-thalassaemia on cholecystitis and cholecystectomy in sickle cell disease. Hematology. 2017;22(7):444–9. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28220719

2. Vídeo obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=DZ7yHQAJBnw&feature=emb_logo

Prueba de Tamizaje y una confirmatoria para colelitiasis

Prueba de Tamizaje

Se recomienda realizar la investigación de factores de riesgo en mujeres

asintomáticas en torno a los 40 años de edad. Esta evaluación se podría realizar

durante el examen de medicina preventiva del adulto recomendado por el

Ministerio de Salud.

Los factores de riesgo a evaluar son:

• Multiparidad
• Índice de masa corporal IMC >25
• Nivel educacional < 8 años
• Ascendencia mapuche (al menos 1 apellido

Prueba confirmatoria

Se procederá a solicitar ecotomografía abdominal priorizada a:

1.  Las mujeres asintomáticas con factores de riesgo demostrados
2.  Población sintomática de ambos sexos entre 35 y 49 años (se considera equivalente a la existencia de síntomas actuales, el antecedente de cólico biliar previo, colecistitis crónica no operada, o una ecotomografía abdominal previa compatible con colelitiasis).
3. Población de ambos sexos con antecedente de cólico biliar previo, colecistitis crónica no operada, o una ecotomografía abdominal previa compatible con colelitiasis, de ambos sexos y toda edad.

Referencias:

GUIAS CHILENA Colesistectomia-preventiva-CA VESICULA. 2014;[Citado el 27 de octubre del 2019] Disponible en: http://www.bibliotecaminsal.cl/wp/wp-content/uploads/2016/04/Colesistectomia-preventiva-adultos.pdf

Alteraciones de la Epigenómica en la Colelitiasis-Análisis mediante Western Blot

Aplocación de Western Blot para detectar la manifestación inusual de Live Staphylococcus saprophyticus, Corynebacterium urinapleomorphum, y Helicobacter pylori en la vesícula biliar con colecistitis.

Las muestras bacterianas se resolvieron en 6% y 8% en geles de SDS-PAGE, seguido de transferencia Western utilizando el método de transferencia semiseca. anticuerpos anti-CagA monoclonales de ratón se adquirieron de Austral-Biológica.

Estos anticuerpos se generaron, purificarse y prepararse usando estándar protocolos del fabricante (biogénicos GmbH, Berlín, Alemania). inmunoglobulinas de cabra polivalente anti-conejo o anti-ratón acoplados a peroxidasa de rábano picante se utilizaron como anticuerpos secundarios (DAKO, Glostrup, Dinamarca). Las inmunotransferencias se desarrollaron usando el kit de Western blot ECL Plus (GE Healthcare, Buckinghamshire, Reino Unido)

La posible contribución de S. saprophyticus,  C. urinapleomorphum, y H. pylori  a la vesícula biliar patología todavía no está claro y  por lo tanto es necesario investigar si este entorno puede representar un depósito para la supervivencia y el crecimiento que podría servir como una fuente potencial para la transmisión bacteriana más estudios. 

En este caso, es notable que el tratamiento antibiótico erradicada H. pylori desde el estómago, pero no de la vesícula biliar.

Referencias: 
Antigua: Menéndez-Sánchez P, León-Salinas C, Amo-Salas M, Méndez-Cea B, García-Carranza A. Asociación de parámetros analíticos y radiológicos en el diagnóstico de la colecistitis aguda. Rev Gastroenterol Mex [Internet]. 2019;84(4):449–54. [Citado el 3 de noviembre del 2019]

Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S037509061830171X?via%3Dihub
Actual: S B. Pubmed. [Online].; 2018 [cited 2019 diciembre 13. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6073424/figure/ijms-19-01826-f001/.
Imagen tomada de: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/9/93/Western_blot_transfer.png/750px-Western_blot_transfer.png